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如何正確地檢測(cè)和保存氨基柱:方法與注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2023-04-24      點(diǎn)擊次數(shù):1689

氨基柱的柱效檢測(cè)及保存方法

氨基柱是以硅膠作為基質(zhì)載體,鍵合氨基的色譜柱。氨基柱通常用于分析糖類化合物,所使用的流動(dòng)相通常是甲醇、乙腈和緩沖鹽溶液,其中乙腈的使用相對(duì)較多。

使用氨基柱時(shí)易受水解影響,因此需要注意以下事項(xiàng):

  1. pH值越低,水解發(fā)生的危險(xiǎn)性越大,因此應(yīng)嚴(yán)格控制pH范圍;

  2. 流動(dòng)相中水的比例越高,水解發(fā)生的危險(xiǎn)性越大。

因此,在使用后以及長(zhǎng)時(shí)間放置該柱前,必須進(jìn)行必要的清洗,并將氨基柱保存于純的有機(jī)溶劑中以進(jìn)行保養(yǎng)。

氨基柱的柱效檢測(cè):

柱效檢測(cè)是判斷一個(gè)用戶的經(jīng)驗(yàn)是否足夠的指標(biāo)之一,用戶可以習(xí)慣配制一些柱效檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)溶液。在柱效檢測(cè)方面,我們提供一個(gè)通用的方法,可用于檢測(cè)硅膠柱和氰基柱。

流動(dòng)相:10% 乙酸乙酯 + 90% 正己烷,流速為1.0。

標(biāo)準(zhǔn)溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯。

檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。

此方法特別適用于剛購(gòu)買氨基柱時(shí)進(jìn)行檢測(cè),如有問(wèn)題,可及時(shí)與氨基柱廠家溝通。此外,建議在柱子準(zhǔn)備放置相當(dāng)長(zhǎng)一段時(shí)間之前,進(jìn)行充分清洗后進(jìn)行檢測(cè),以作為記錄留存。在平常的使用過(guò)程中,如果分析物是重復(fù)的,可以根據(jù)分析物的分離情況判斷氨基柱效;但是,如果分析物和分析條件不同時(shí),定期檢測(cè)柱效可以避免柱效下降導(dǎo)致分離不佳再分析查找原因這樣浪費(fèi)時(shí)間和勞力的過(guò)程。特別要注意的是,當(dāng)氨基柱(或氰基柱)在反相條件下使用時(shí),請(qǐng)注意流動(dòng)相的換相過(guò)渡問(wèn)題。

氨基柱沖洗:

在使用正相條件下的氨基柱時(shí),可按硅膠柱的清洗方法進(jìn)行清洗;在使用反相條件下的氨基柱時(shí),則應(yīng)按照C18柱的清洗方法進(jìn)行清洗。

氨基柱的保存:

  1. 在正相條件下,使用氨基柱后,將柱子清洗干凈,并用正己烷-乙腈(比例為99:1)保存。

  2. 在反相條件下,如短期不使用,可用甲醇或乙腈進(jìn)行保存。若長(zhǎng)期不使用,則需要將甲醇逐步用異丙醇和CHCl3置換,最后用正己烷保存。


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